質粒構建
- 分類：蛋白制備
- 發布時間：2020-08-14 00:00:00
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概要:
詳情
除非客戶指定構建方式或文獻中有充分記載，佰翱得會從四個主要表達宿主（細菌，酵母，昆蟲細胞和哺乳動物細胞）中按照內部評估的結果，選擇合適的方案表達重組蛋白。 我們提供了用于實現表達的質粒和細胞選擇。下是我們可以嘗試在大腸桿菌中進行表達的參數概述：
1. 篩選表達標簽和載體
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N末端的標簽 |
C末端的標簽 |
載體 |
2. 篩選感受態
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BL21 (DE3) Rosetta (DE3) Origami 2 (DE3) C41 (DE3)orC43 (DE3) Arctic (DE3) Tuner(DE3)0.1mM IPTG BL21 (DE3) pLysS |
最常用的 稀有密碼子 二硫鍵及稀有密碼子 疏水性蛋白 TPN30 & TPN60 分子伴侶 為了得到更好的表達適當的降低表達量 降低毒性蛋白的本底表達 |
3. 篩選分子伴侶
pG-KJE8,pGro7, pKJE7, pGTf2,pTf16
Dsba和Dsbc（用pET21a載體在細胞周質空間中表達）
